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气质联用仪(GC-MS)仪器操作
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GC进样系统是气相色谱仪,作用有两个:1、通过进样口将将样品导入到系统当中进行气化;2、将气化后的样品带入到色谱中来。

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如何查看已经检测过的数据

首先选中数据列,点击view chromatogram

如何扣背景

选择要扣背景的峰,进行适当地放大,点击,弹出Combine Spectrum。在色谱峰的半峰宽位置处用鼠标的右键点击色谱峰的左侧再拖到右侧,松开右键,弹出框的Average有数据;然后在靠近色谱峰的基线处,用右键点击峰左右两侧分别拖拽一段后松开,弹出框的Subtract有数据,点击ok,此时弹出的对话框就是已经被扣除背景的质谱图。可对该质谱图进行谱库检索,点击书本按钮会进行谱库检索,弹出的对话框就是检索的结果。在Hit List 中,第二列显示的是反向匹配度,第三列是正向匹配度,两列数值越大,说明匹配度越高,搜索出来的化合物与样品峰匹配的可能性就越高。在Hits区域,第一个质谱图就是扣除背景的质谱图,下面两个所显示的就是在谱库当中与位置样品峰所匹配的化合物的质谱图。当目标峰较小,背景干扰比较大时,可以多次扣除背景。扣除背景后可直接点击F1按钮,即可出现检索后的结果。

点击TIC可使谱图回到最原始的状态。

若想对谱图进行叠加,则需要对谱图的强度和显示方式进行修改。先点击Display,再点击View,在弹出框中,将Largest Peak改为Intensity,该数值需参考色谱图右上角数值的大小进行填入,填好后点击ok,此时谱图响应方式已发生改变。点击File,点击Open,在左上角区域打开要添加的格式为RAW格式的谱图,右下角的AddReplace选项可根据需求切换成自己需要的插入方式

谱图积分操作:点击在弹出的谱图当中就已经是提取188的质量色谱图,而下方是全扫的总离子流图。在提取之前要确保是在总离子流图谱的界面下操作。具栏上的积分按钮,弹出的对话框就是积分后的结果;如果想将叠加的谱图同时积分,在叠加的情况下,点击全球     按钮,再点击积分     按钮,就可以全部积分了

提取离子操作:在提取离子前,首先要了解目标化合物的提取离子是多少,比如该化合物的提取离子是188,则需在主界面上点击Mass Chrmatogram按钮,在弹出框里输入该数值.在弹出的谱图当中就已经是提取188的质量色谱图,而下方是全扫的总离子流图。在提取之前要确保是在总离子流图谱的界面下操作。如果对其他化合物感兴趣的话,在知道该化合物特征离子的前提下,可继续进行提取。在提取前要保证所提取的仍然是总离子流图。点击好该谱图后,点击mass chromatogram,在该对话框中输入m/z值如149,选择Add trace,ok,此时弹出的谱图就是提取149的质量色谱图。此时仍然可以点击mass chromatogram,对两个质量数进行同时提取。比如说键入“149188”,点击ok弹出的谱图就是同时提取149188的质量色谱图。此外,除了运用+对多个质量数进行同时提取外,还可以运用-号将某一个质量数的响应值减去。如选择63作为被减数来进行-号的运用。

 

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检漏校准调谐

检漏在传输线和离子源的温度在100以下时进行。在真空规左侧的栏里输入相应的数字。Mass一列分别为4(He),8(H2O),28(N2),32(O2),Span和Gain列分别为4和1。在检漏开始前要将气相色谱面板的柱流量设置成1mL/min,进样口分流比设置成50:1,当抽取一段时间真空后,再回到调谐界面打开灯丝。通过观察四个质量数的百分数值来判断是否漏气。通常水峰高于氮峰和氧峰,为正常检漏通过后关闭灯丝。

调谐:当检漏通过后,将传输线和离子源温度升高到测试用温度250,然后质量数窗口上输入调谐的质量数,分别为69,131,219和502。等待传输线和离子源的升温。待升温完成后,打开校正气按钮并打开灯丝,出现相应质谱峰后,点击左侧按钮,在弹出的对话框中点击Start,等待进度条完成即可,此过程不要进行任何其他无关操作。3-5min过后调谐完成,关闭对话框,点击File-Save as以日期为文件名保存调谐文件。69的峰一般占6个方格,峰尖一般在质量轴上,如果不在,点击Calibration,再点击开始按钮,在弹出的对话框中按照图中红色框部分指示进行,再点ok,最后以日期命名并保存。当校准完成后,再点校准气按钮将其进行关闭,再关闭灯丝。

调谐目的:之所以进行调谐是为了调整质谱检测参数的设置直到获得优化后的质谱峰强度,峰型和分辨率,使得我们在检测时可以获得更为理想的结果。清洗后的离子源在使用之前也要进行调谐和校准工作,而后再进行分析。

 

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气质联用仪通过一根传输线连接在一起。

气相色谱仪的两个作用:

1:通过进样口将样品导入系统当中进行汽化;

2:汽化后的样品带入到色谱柱中进行分离。

汽化后的样品通过传输线导入到质谱中被打碎成气态离子,再进行分离和分析。在质谱中,离子源,质量分析器,检测器是其主要部件。

其中离子源所起到的主要作用就是将前面气相色谱当中所形成的气态样品分子在离子源内使其成为气态离子。

EI源:电子轰击电离源常用。

组件于组件之间无任何连接线,靠卡槽连接,便于短效更换。

灯丝:

最先是在离子化室外放一根灯丝,效率低;   而后在离子化室对面增加了一个收集极,使能够牵引灯丝发射的电子在离子化室内定向运动从而提高电子轰击效率;目前是在前者的基础上,在收集极和灯丝两端分别加了磁铁,从灯丝发射的电子在离子化室内,在磁场和电场的作用下呈螺旋状运动。

质量分析器:四级杆分析器

检测器:

从分析四级杆出来的碎片离子,经过接地的离子进口板,进入离子光学系统先聚焦,过滤部分带电干扰离子,随后进入一个270°的偏转电场。由于离子本身带电,因此它们会大角度偏转后飞向高能打拿极,而随离子一起进入检测器区域的中性分子由于不受偏转电场的作用,继续保持直线飞行飞出离子轨道。打拿极经离子束轰击而置换出电子。这些电子再由一些离散型的电子倍增组件逐级放大,得到最终电信号,并传送给数据处理系统。

质朴调谐:在TurboMass的General Status由initializing变为绿色的ready后,点击MS状态栏Operate右侧眼镜状按钮进入调谐界面。在传输线和离子源温度低于100度时,点击Option的Pump/Vacuum system on进行抽真空,同时观察真空规的指针是否达到绿色,一般需呀3-5分钟即可达到。

 

 

 

 

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授课教师

有机产品北区技术支持经理 高级工程师

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